「译文」| 凝胶电泳

本文翻译自Real-world Problems for Phys25, Summer 2006系列文章第二篇A Solution to RWP1 - Gel Electrophoresis


收集信息

从问题的描述中可以得知,DNA片段带负电,并且电荷量与片段的长度成正比,但是我们不确定每个碱基对的电荷量。每个碱基对可能的最小电荷为:q=-2e=-2(1.6e-19C),平均碱基对的分子“重量” = 635 daltons = 635(1.67e-27kg)=1.06e-24kg,可分析的片段范围为 200bp 至 50kb,对应于:m=2.1e-22kg5.3e-20kg

注意:该技术可分析的最大DNA片段只是单倍体细胞核DNA的一小部分:(5e4)(635)/1.9e12=1/60000

根据DNA碎片移动所需的时间,可以肯定它们不是在加速,而是在以1英尺/小时的速度移动。尽管没有明确说明,但所施加的电场必须是均匀的,由差值为50至150v的两个平行线性电极产生。假设凝胶在盒子的长度范围内流动,则电场强度必须大约为:E=(100V)/(20cm)=5V/cm=500V/m

组织信息

这个问题主要是一个均匀电场的应用。与以往教科书问题不同的重要方面是,凝胶对带负电荷的DNA片段提供了一种与静电力相反的阻力。

分析

作用在DNA片段上的合力必须为零,否则它会加速,并在不到30分钟内移动~20厘米。

验证:假设每个碱基对的最小电荷为-2e,则长度为 1000bp 的典型DNA片段上的力为 F=qE=-2(1.6e-19 C)(500 N/C)=-1.6e-16N,如果没有相反的力,这将导致加速度:a=F/m=(1.6e-16N)/(1000*1.06e-24kg)=1.5e5m/s^2=15000g!!!如果真是这样,那么DNA片段将在瞬间穿过凝胶盒的长度!

从Physlet模拟中可以清楚地看出,较小的DNA片段确实比较大的分子移动得更快,移动得更远,尽管事实上较大的分子应该具有更大的电力,因为电荷与碱基对的数量成比例。显然,这些分子所受的阻力很大程度上取决于它们的大小,就像物体在空气中下落一样,在决定终极速度方面,密度比大小更重要。

Physlet模拟并未显示出较大的DNA片段在较高的电场中按比例迁移得更快,而是随着施加电压的增加,在条带的位置只是向右不断地移动。如果这种非线性效应确实发生在现实生活中(如问题陈述中所示),那么它可能是由于作用在较大分子上的非线性阻力。

从这个模拟中可以看出,迁移速率随外加场强的增加而增加,但不是线性的。相反,在较低的场,迁移速率增加得很快,而在较高场,迁移速率增加得比较慢,形成了一条曲线,看起来类似于灯泡的I-V(电流-电压)图(在开始趋于平稳时上升并向右)。

学习

DNA片段在凝胶电泳箱中的移动与电子在导线中的移动非常相似。在这两种情况下,带负电荷的粒子都是在外部电场的作用下移动,但是这些移动的粒子会因为障碍物的阻碍而放慢速度,就像“蜗牛一样”。如果电极是点而不是线,那么产生的电场就是不均匀的,并且在中心(电场最强的地方)的迁移速度会比靠近凝胶盒边缘的地方大。即使具有平行线几何形状,在盒子侧面附近的电场也较弱,因此希望分析仅限于线性电极之间的矩形区域。

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